欧美区一区二区三区,av在线一区二区\',成人国产精品探花在线观看,五月激情六月丁香,av一区二区在线免费下载

PNA 是由特殊的多酰胺骨架與堿基通過亞甲羰酰鍵連接其骨架上的 , 因此此分子結構不被核酸酶和蛋白酶識別、結合 , 所以 PNA 能抗酶的降解 ,在人血清、細菌提取物、埃氏腹水癌細胞核細胞質抽提物中均無明顯降解 , 它抵抗真菌蛋白酶 K 、豬小腸黏膜蛋白酶分解的能力是對照肽類的 1 000 和 30倍 , 并且在一個相當大 pH 值范圍內 PNA 都是穩(wěn)定的 , 因此無論在體內或體外 PNA 都能長期存在。PNA 與 DNA 的結合導致限制性內切酶所需的特征結構發(fā)生改變 , 從而序列專一性地抑制內切酶對雙鏈的切割。利用 PNA 的這種性質實驗中當富含胸腺嘧啶的純嘧啶 PNA 通過鏈取代機制與dsDNA雜交 , 使被取代的 DNA 鏈有單鏈性質 , 能被單鏈核酸酶 SI 降解 , 尤其當 dsDNA 上有兩個相連相鄰的PNA 靶序列時 , 利用靶序列互補的 PNA 片段 , 就可使核酸酶 SI 選擇性地斷裂 , 起到限制性內切酶的作用。進一步實驗證明 , 當同性嘧啶 PNA 寡聚體連接在一起形成所謂 PNA 夾子時 , 鏈侵染的過程能夠識別雙股 DNA 中短于 7 個堿基長度的同性嘌呤序列 , PNA 夾子結合到雙鏈 DNA 上 , 就會阻止酶的作用。應用一個 PNA 夾子就能保護一段同源嘧啶靶子所覆蓋的專一性甲基化位點 , 甲基化后再除去PNA 夾子 , 則相應的限制酶就可以酶切這段 DNA ,因此只有夾子保護的那段甲基化酶作用位點 , 才適合作為限制酶的底物。 Boyles&Salynn 等人利用此原理采用原位雜交的方法很有效地區(qū)分結核菌和非結核菌 ,V eselkov 等亦使用此原理在很專一的位點上酶切了酵母菌基因組 , 實驗中當 PNA 寡聚體連接到固定相上時 , 它親和捕獲堿基效果很好 ,Boffa等曾用這種方法獲得含有 CGA 重復序列的活性轉錄基因。